杏园生物

qPCR芯片样本接收指南—细胞样品采集操作流程

1. 贴壁细胞

（1）贴壁细胞培养或处理结束后，去除培养液；

（2）按每10 cm² 培养面积加1 mL TRIzol 试剂的比例加入TRIzol 试剂；

（3）用1 mL枪头反复吹打， 使TRIzol接触所有长有细胞的培养瓶表面进行充分消化；

（4）转移到RNase-free 的试管中反复吹打细胞直至看不见成团的细胞块，整个溶液应该为清亮而不粘稠的状态；

（5）放入干冰或-80℃冰箱中保存。

2. 悬浮细胞

（1）悬浮细胞培养或处理结束后，离心（1500g，4℃离心10min）去除培养液；

（2）保留的细胞用PBS 缓冲液快速洗一次，离心除去PBS 缓冲液；

（3）按照每5×10⁶ 个细胞加1 mL TRIzol的比例加入TRIzol试剂，反复吹打细胞直至看不见成团的细胞块，整个溶液呈清亮而不粘稠的状态；

（4）放入干冰或-80℃冰箱中保存。

3. 注意事项

（1）对于提RNA的细胞样品，我们不接收未经TRIzol试剂处理的细胞样品。

（2）客户如果提供冻存可复苏的细胞株，应首先验证所用冻存方法用于RNA 提取的可靠性，并且在送样时提供详尽的复苏方法，以便确保实验成功。