qPCR芯片样本接收指南—组织样品采集操作流程

1 直接冻存

• 准备好液氮预冷的冻存管，用记号笔在冻存管盖上写明样品编号，在管壁上写清编号及组织类型采样日期等。（提前准备好）
• 准确切取所需组织，最好切为细长薄块，剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织。
• 在RNase-free的0.9％生理盐水中快速漂洗样品，以去除血渍和污物，将组织剪切成小块，厚度不要超过 0.5cm。
• 装入冻存管，旋上盖子，迅速投入液氮冷却5分钟以上。
• 解剖结束后将冻存管倒入泡沫箱分离出各分组，装入样品袋，标记清晰。（分离冻存管时要带厚手套，防止液氮将手灼伤）
• 将样品袋转移到干冰或-80℃保存。

• 准备好已加有适量 RNAlater的冻存管，用记号笔在冻存管盖上写明样品编号，在管壁上写清编号及组织类型采样日期等。（提前准备好）
• 准确切取所需组织，最好切为细长薄块，剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织。
• 在RNase-free的0.9％生理盐水中快速漂洗样品，以去除血渍和污物，将组织剪切成小块，厚度不要超过 0.5cm。
• 将新鲜组织样品放入已加有适量 RNAlater 的离心管中，RNAlater 超过组织样品的 10 倍体积以上，且保证样品完全浸没在RNAlater 中，4℃过夜，使 RNAlater 充分渗透到组织中
• 将样本转移至-20℃或-80℃冰箱长期保存。

3 注意事项

• 不要用 Eppendorf 管液氮保存组织样品 ，以免从液氮中取出时发生爆裂而造成样品损失 。
• 冻存管或样品袋上的记号笔标记切记不要与乙醇等有机溶剂接触，防止标记模糊或褪色。
• 冻存管只能用记号笔标记，禁止用胶布粘贴信息，会因掉落而丢失信息。
• 冻存管盖不能拧太紧，一般拧紧后退回一点，以防止从液氮取出时发生爆裂。
• 液氮罐口较为狭小，所以放入的物品不易过大，以免无法取出。
• 对肿瘤组织的取材，应尽可能准确地判定肿瘤组织和正常组织，保证结果的精确性，如果有可能请根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。
• 在临床手术过程中采集的病理或正常样品 ，如果没有条件立即取出进行后续处理 ，请在切下组织后立即放入液氮中保存。
• 用于RNA抽提的富含降解酶的组织，如胰腺、小肠和肝脏，最好将组织直接剪成约100mg的小块，立即放进液氮中。
• 用于RNA抽提的肝脏处理时，应该先去掉富含RNA酶的胆囊，再取组织。